Analyse de l'expression protéique

ELISA
Courbe standard IL-6 chez l'homme

 

Nous avons un lecteur de plaques Synergy 2 avec une PMT décalée vers le rouge, un lecteur de plaques Cytation 3 contenant des monochromateurs qui peuvent mesurer une large gamme de longueurs d'onde, et un laveur de microplaques 405LS pour diminuer la quantité de lavages incomplets ou irréguliers. Nous avons une grande expérience de l'utilisation des ELISA de différents fournisseurs et de plusieurs types d'échantillons tels que des cellules cultivées, du sang entier, des tissus frais et des tissus congelés. Les kits ELISA basés sur l'absorbance ou la fluorescence peuvent être utilisés pour produire une courbe standard et quantifier avec précision une protéine spécifique dans vos échantillons. Pour obtenir les résultats les plus précis, nous générons régulièrement des courbes standard à partir d'étalons de protéines en double ou en triple et nous quantifions la protéine qui vous intéresse dans chaque échantillon à partir de puits en triple exemplaire.

ELISpot/FluoroSpot
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Nos services in vitro proposent désormais le test immunoenzymatique (ELISpot ou FluoroSpot) pour mesurer la fréquence des cellules sécrétant des cytokines dans les suspensions cellulaires.  Ce test permet à la cytokine sécrétée de se lier à l'anticorps recouvert, résultant en un point unique. L'analyseur universel CTL S6 est utilisé pour capturer des images de qualité et analyser les points.  Équipé de quatre filtres optiques, l'analyseur CTL est en mesure de détecter jusqu'à trois analytes simultanément grâce à des affichages colorimétriques ou fluorométriques.  Les kits ELISpot ou FluoroSpot sont compatibles avec le sang, les lymphoïdes et les tissus solides.  Les échantillons sont systématiquement effectués en double ou en triple exemplaire afin d'obtenir une moyenne permettant de déterminer la quantité de points dans chaque échantillon.

Western blot
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Avec nos clients, nous avons réalisé de nombreux western blots avec succès sur un grand nombre de cibles pertinentes en oncologie. Notre équipe compte une vaste expérience en matière de western blots à partir de divers types d'échantillons, cellules cultivées, tissus frais ou tissus congelés. Avec le système d'imagerie Typhoon, il est possible de détecter des anticorps secondaires chimiluminescents, chimiofluorescents et fluorescents, ce qui permet d'identifier plusieurs protéines recherchées en parallèle. Nous pouvons également quantifier les bandes sur une membrane avec le logiciel ImageQuant pour déterminer la taille et l'intensité relative de chaque bande pour chaque échantillon.

Cytométrie en flux
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Nous avons deux cytomètres en flux Attune NxT avec quatre lasers capables de détecter des molécules fluorescentes dans 14 canaux. Que vous ayez besoin d'examiner l'abondance d'une protéine spécifique ou de plusieurs protéines à la surface ou à l'intérieur des cellules, nos experts en cytométrie en flux peuvent obtenir les résultats voulus avec l'Attune NxT. Surveillez l'abondance ou la localisation vers/depuis la membrane plasmique d'une protéine spécifique au fil du temps avec un traitement ou comparez les niveaux d'une protéine dans différentes lignées cellulaires ou souches de souris. Combinez la détection d'une protéine spécifique avec l'un de nos autres dosages courants de cytométrie en flux (ci-dessous), tels que l'apoptose, le cycle cellulaire ou le test de viabilité cellulaire pour déterminer si l'abondance de la protéine change à différentes étapes d'un processus cellulaire. Nous avons réussi à détecter des centaines de protéines différentes dans des échantillons de type cellules cultivées, sang, tissus et organes. Dans le sang, nous avons réussi à détecter des protéines grâce à un dosage sans lavage ni lyse qui réduit les manipulations et permet l'analyse de très petites quantités de sang.  En savoir plus sur nos services de cytométrie en flux.

Réseaux de billes cytométriques
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Nous avons aussi un système Luminex® 100™. Ce système est un analyseur flexible basé sur les principes de la cytométrie en flux. Ce système vous permet de mesurer simultanément (en multiplex) jusqu'à 100 analytes dans un seul puits de microplaque, grâce à des échantillons à la taille très réduite. Ce système fournit des résultats rapides et rentables sur de nombreux formats de dosage, y compris les dosages d'acide nucléique, les dosages récepteur-ligand, les immunoessais et les dosages enzymatiques. Des plaques commerciales, préfabriquées et multiplexes sont disponibles pour mesurer les composants des voies de signalisation des cellules entières ou des cytokines telles que la voie AKT, l'apoptose, les chimiokines, les cytokines, les cytokines inflammatoires, les facteurs de croissance et les voies TH1/TH2.

Immunohistochimie
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Analysez vos échantillons de tissus avec la coloration IHC pour détecter des cellules anormales telles que celles des tumeurs cancéreuses. Des marqueurs moléculaires spécifiques sont caractéristiques d'événements cellulaires particuliers, tels que la prolifération ou la mort des cellules (apoptose). L'IHC est aussi communément utilisée dans la recherche fondamentale pour comprendre la distribution et la localisation des biomarqueurs et de protéines exprimées différemment dans différentes parties d'un tissu biologique. Nous offrons une gamme complète de services internes d'histologie et d'IHC, y compris des travaux sur mesure, et nous ajouterons régulièrement des marqueurs. Nos services comprennent :

  • Panels : cancer, immuno-oncologie
  • Tissu normal, tumeur, xénogreffe, lignée cellulaire, validation, immunofluorescence, immunocytochimie, multiplex

Immunohistochimie et marqueurs reconnus

Microscopie à fluorescence
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Nous avons un microscope à fluorescence inversée Olympus CKX53F pour visualiser les molécules/protéines fluorescentes dans les cellules vivantes et un lecteur d'imagerie multi-mode BioTek Cytation 3 pour visualiser les molécules/protéines fluorescentes dans les cellules vivantes ou fixes. En utilisant la microscopie à fluorescence sur des cellules vivantes, nous pouvons déterminer rapidement le pourcentage de cellules contenant une molécule ou une protéine fluorescente sans manipuler les cellules. Avec des cellules fixes, nous pouvons déterminer la localisation de protéines spécifiques dans les cellules après coloration avec des anticorps marqués par fluorescence et en utilisant des colorants fluorescents tels que DAPI, FM 1-43, Calcein ou DiOC6 pour définir des compartiments spécifiques dans une cellule.