GL261-luc : un modèle pour l'immunothérapie et la radiothérapie

Date : février 2017

Auteur : Maryland Franklin, PhD, vice-présidente du développement scientifique

Contactez l'équipe scientifique en oncologie préclinique pour en savoir plus.


Le glioblastome multiforme (GBM) est la forme la plus agressive de cancer du cerveau. Les tumeurs GBM se développent dans un microenvironnement tumoral assez immunosuppressif et dans un système nerveux central relativement privilégié par le système immunitaire. Lorsqu'un GBM est diagnostiqué chez un patient, le pronostic reste défavorable avec les thérapies conventionnelles qui comprennent la radiothérapie, la chimiothérapie et la chirurgie.

L'immunothérapie offre une approche alternative au traitement, visant à renforcer le système immunitaire pour éradiquer la maladie. Dans le passé, l'utilisation des thérapies à base d'anticorps a été limitée pour le traitement du GBM en raison de l'obstruction causée par la barrière hémato-encéphalique à l'administration de la thérapie. Cependant, les recherches sur les médicaments immuno-oncologiques peuvent permettre de surmonter cette limitation, car il semble que seules les cellules immunitaires soient nécessaires pour franchir la barrière hémato-encéphalique. Les essais précliniques de cette classe de médicaments nécessitent l'utilisation d'un ensemble unique de modèles précliniques utilisant des souris immunocompétentes et le placement orthotopique des cellules tumorales dans le cerveau. Chez Covance, nous utilisons des modèles orthotopiques de GBM depuis plus de 12 ans.

GL261 est l'un des modèles de gliome syngénique murin les plus fréquemment utilisés. Nous utilisons nos capacités d'imagerie de pointe pour approfondir la connaissance de la pharmacologie de ce modèle en utilisant une lignée cellulaire GL261 qui exprime la luciférase (GL261-luc2, Caliper Life Sciences). Cela permet une visualisation longitudinale, in vivo, de la croissance de la tumeur et de la réponse au traitement dans le cerveau via l'imagerie par bioluminescence (BLI). 

At Labcorp, we have acquired Xstrahl’s Small Animal Radiation Research Platform (SARRP) allowing for focal beam irradiation of the brain, sparing the rest of the mouse, including secondary lymphoid organs critical for mounting an immune response.

Fig. 1 : GL261-luc orthotopique : le signal BLI dans le cerveau au fil du temps
Fig. 1 : GL261-luc orthotopique : le signal BLI dans le cerveau au fil du temps

Nous avons utilisé le modèle GL261-luc pour tester les rayons focalisés avec et sans l'anticorps inhibiteur du point de contrôle immunitaire, l'anti-PD-1. Dans un premier temps, nous avons testé deux doses individuelles de rayon focalisé afin de déterminer une dose optimale pour les études combinées. Nous avons observé qu'une dose unique de 15Gy entraînait une diminution spectaculaire du signal BLI global (figure 1, ligne rouge) et était curative dans ce modèle (100 % des souris étaient exemptes de tumeur jusqu'à 60 jours après l'implantation). Une dose unique de 10Gy a entraîné une stase tumorale modérée suivie d'une croissance rapide de la tumeur (figure 1, ligne bleue) et n'a été que modérément active avec 25 % de survie le jour de l'étude 42. Ainsi, dans une étude de suivi, nous avons utilisé une dose unique de 10Gy avec et sans 10 mg/kg d'anticorps anti-PD-1 et avons suivi la progression de la maladie et le bénéfice thérapeutique grâce au BLI.

La figure 2 illustre le traçage de BLI chez des souris représentatives de chaque groupe. La moyenne du groupe pour chacun a été quantifiée et représentée à l'aide d'un graphique (figure 3). En outre, la survie globale basée sur les paramètres de morbidité et de mortalité a été calculée (figure 4). La somme des données montre que le rayon focalisé ou l'anticorps anti-PD-1 seul présente un avantage supplémentaire et que la combinaison des deux thérapies améliore l'activité anti-tumorale (100 % de survie pendant plus de 60 jours).

Fig. 2 : GL261-luc orthotopique : images BLI représentatives  au fil du temps
Fig. 2 : GL261-luc orthotopique : images BLI représentatives  au fil du temps
Fig. 3 : GL261-luc orthotopique : le signal BLI dans le cerveau au fil du temps
Fig. 4 : GL261-luc orthotopique : survie globale (morbidité/mortalité)

Fig. 3 : GL261-luc orthotopique : le signal BLI dans le cerveau au fil du temps

Fig. 4 : GL261-luc orthotopique : survie globale (morbidité/mortalité)

In addition to bioluminescence, Labcorp has a host of other imaging technologies, including PET, SPECT, an CT modalities, to further interrogate parameters related to GBM such as tumor volume, vascular perfusion/permeability, metabolic activity, and edema. Labcorp also has comprehensive In Vitro Services including flow cytometry to best evaluate immunotherapies.

Nous contacter dès aujourd'hui pour discuter de votre étude GL261-luc.

Références

 
Remarque : Veuillez noter que toute la prise en charge des animaux et l'utilisation de ceux-ci ont été effectuées conformément à la réglementation sur le bien-être des animaux dans un établissement accrédité par l'AAALAC, avec examen et approbation du protocole de l'IACUC.

Entamons le dialogue

Nous contacter